多検体変動解析の課題を解決
メタボロミクスとは細胞内に存在する脂質を含む代謝物の大規模変動解析が必要となります。多検体のサンプルから目的の代謝物質の量的変動を解析するには、研究者の膨大な手作業を必要としています。また、測定手法・質量分析器によって異なる形式のデータが生成され、それぞれのソフトウェアで解析したデータから変動解析を行うのは困難でした。本ソフトウェアは、様々なデータを統合し解析を可能にし、メタボローム解析を包括して支援することを目的に開発しました。
また、実際の研究者から、ターゲット解析では質量精度が低く脂質のように共溶出する異性体の識別ができない、さらに保持時間のずれによりミスアラインメントが起こることを解決してほしいとの要望があり、LipidSearchとの統合機能と保持時間の自動補正を搭載し、効率的で精度の良いメタボローム解析プラットフォームを実現しました。
シンプルなワークフロー
MetaboAlignは簡便な解析ワークフローで熟練度に関わらず解析が可能
※現行の連携機能はLipidSearchのみに対応
Sample → LC-MS/MS・GC-MS/MS測定 → Raw Files → プロジェクト登録 → アラインメント処理 → 結果バリデーション（LipidSearch・外部データベース連携）
解析時にはターゲットのチャンネル情報（name、m/z、RT等）をXLS形式で登録し、必要に応じて内標情報を読み込むことで内標を用いた濃度計算も自動実行されます。脂質を対象とした解析では、ノンターゲット脂質解析ソフトウェアLipidSearchおよび外部データベースとの連携により、ターゲットピークへの正確な成分帰属を実現します。
MetaboAlignでは、プロジェクト登録、アラインメント実行、結果バリデーションまでの3ステップを実施します。
STEP1：プロジェクト登録
Triple 四重極質量分析計や 高分解能質量分析計（HRMS）を用いて、LC‑MS、GC‑MS で測定し取得した生データ群を「プロジェクト」単位で登録します。各社質量分析メーカーのデータフォーマット、SRM/MRM, PRM、DDA、DIA、Full Scanに対応しています。HRMSで得られたデータもSRMライクに定量解析します。
STEP２：アラインメント処理
登録した同一プロジェクト内のサンプルをグルーピングし、正確な比較定量解析を行います。アラインメント処理では、サンプル間の保持時間のズレを一括自動補正して、ミスアラインメントを防ぎ、100検体以上のオミクスデータを一斉に定量解析します。アラインメント処理はターゲット解析およびノンターゲット解析に対応しています。
STEP３：結果バリデーション
ソフトウェア画面上で、アラインメント処理で得た定量解析の結果を一覧で確認します。定量計算の確からしさを示すスコア、ピーク面積値、成分情報に基づくピークフィルタリング、クロマトグラムピーク比較や、クラスごとの保持時間補正値の確認、マニュアルでのピーク面積の再計算といった充実したバリデーション機能により、解析結果の信頼性を高めます。
※ノンターゲット解析ソフトウェアとの連携
ノンターゲット脂質解析ソフトウェア LipidSearch（リピッドサーチ）の同定結果をアノテーションすることで、ターゲットピークの成分を正確に帰属することができます。この連携機能により、精度の高いターゲット解析が可能となります。
